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【特别推荐】:小而密低密度脂蛋白胆固醇(sd LDL-C)测定试剂使用说明、性能指标  
发布者:idrfz.chen   
 

  (本试剂仅用于科研、实验、技术支持,不直接应用于临床诊断)

 

【简介】

用于全自动生化分析仪测定小而密低密度脂蛋白胆固醇含量。

低密度脂蛋白( LDL) 是由一系列密度、体积、理化特性不同的颗粒组成,存在明显的异质性。小而密LDL( small dense LDLsdLDL) LDL 亚组分之一,在动脉粥样硬化( As) 发生、发展过程中起重要作用,是冠心病的危险因子。2002 年美国国家胆固醇教育计划成人治疗方案Ⅲ将sd LDL 作为冠心病新的危险因子。

【测定方法】

直接清除法

【测定原理】

第一步,试剂中的多聚体和非离子表面活性剂与sd LDL结合,选择性地抑制sd LDL与胆固醇酶试剂反应,而胆固醇氧化酶(CO)和胆固醇酯酶(CE)与非sd LDL脂蛋白中的胆固醇反应,由于缺乏一个色源,Trinder反应不显色。第二步,sd LDL-C与胆固醇酶试剂反应而显色。

【试剂盒组成】

 

   

   

   

试剂

液体双试剂

试剂Ⅰ:试剂Ⅱ=31

4-氨基安替比林、TOOS、工具酶、表面活性剂等

适量

sd LDL-C校准品

冻干1ml

sd LDL-C

见标签

【样本要求】

标本应空腹抽取,尽快分离血清,在冷藏(2-8)条件可稳定3天。标本如不能及时测定,应于-20保存,避免反复冻融。

【测定步骤】

1.本试剂为液体双试剂,可直接使用。

2.测定参数:波长:546nm;光径:10mm;温度:37

3.测定方法:

加入物

空白管

标准管

测定管

试剂Ⅰ

300

300

300

蒸馏水(uL)

3

-

-

标准液(uL)

-

3

-

样本(uL)

-

-

3

混匀,置37孵育5分钟,读取各管吸光度A1

试剂Ⅱ(uL)

100

100

100

混匀,置37保温5分钟,读取各管吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

4.上机参, 数:

 

37

血清+R1反应时间

300

样本量

3uL

546nm

试剂Ⅰ

300uL

660nm

试剂Ⅱ

100uL

血清+R1+R2反应时间

300

5.计算:

sd LDL-C含量 mmol/L =  [(ΔA标本-ΔA空白)/ (ΔA标准-ΔA空白)]  × 校准品值

【性能指标】

1 空白吸光度 0.05

2 线性范围0-2.60mmol/L

3 批内/分析内精密度  CV5%;批间相对极差 7%;

4 准确性  相对偏差不超过±10%。

5 抗干扰性  血清胆红素<250μmol/LTG<18.2mmol/L、血红蛋白<5.0g/L、抗坏血酸<55mg/dL时,对测定无显著影响。

6 方法对照  用本测定试剂和某进口sd LDL-C测定试剂测定100例血清sd LDL-C含量,结果显示相关系数>0.970

【注意事项】

1、试剂变混浊或空白吸光度值>0.05时,将不能使用,应弃去;

2、建议各实验室建立自己的正常值范围;

3、试剂与样本量可根据需要按比例调节;

4、请勿用嘴直接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应即用水冲洗污染部位;

5、使用配套的校准品校准,校准周期为30天,更换试剂批号时需要重新校准。建议使用正常值和病理值生化质控血清进行室内质控,测定的控制值应在确定的限制范围内,若控制值失控,实验室应采取适当的纠正措施。

6、不能将R1R2混成单试剂工作液。

【参考范围

参考值范围:0.25-1.17mmol/L

建议各实验室建立自己的正常参考值范围。

【储存条件与有效期】

未开封的试剂在2-8避光条件下可稳定14个月,置37水浴至少可稳定7天。

试剂开封后,存放在分析仪试剂仓中(2-8)的试剂在30天内性质稳定。

【参考文献】

1. Okada, M., H. Mitsui, Y. Ito, A. Fujiwara, and K. Inano. 1998. Lowdensity lipoprotein cholesterol can be chemically measured: a new superior method. J. Lab. Clin. Med. 132: 195–201.

2. Sakaue, T., T. Hirano, G. Yoshino, K. Sakai, H. Takeuchi, and M. Adachi. 2000. Reaction of direct LDL-cholesterol assays with pure LDL fraction and IDL: comparison of three homogenous methods. Clin. Chim. Acta. 295: 97–106.

3. Nichols, A. V., R. M. Krauss, and T. A. Musliner. 1986. Nondenaturing polyacrylamide gradient gel electrophoresis. Methods Enzymol. 128: 417–433.

4. McNamara, J. R., D. M. Small, Z. Li, and E. J. Schaefer. 1996. Differences in LDL subspecies involve alterations in lipid composition and conformational changes in apolipoprotein B. J. Lipid Res. 37: 1924–1935.

 

 

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